Técnicas de PCR y Electroforesis: Aplicaciones y Procedimientos
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Preparación de Muestras para PCR
La preparación de las muestras para la Reacción en Cadena de la Polimerasa (PCR) requiere ajustar el volumen de la reacción, elaborar la mezcla "madre" y establecer los controles positivo y negativo.
Ajuste del Volumen de Reacción
- Al diseñar una PCR, se debe decidir el volumen final de la mezcla de reacción, que suele ser de 25 o 50 μl.
- Una vez fijado este parámetro, se calculan los volúmenes de cada reactivo a añadir a la mezcla, dependiendo de la concentración final deseada. La diferencia entre la suma de los volúmenes de cada componente y el volumen final se completa con agua milliQ.
Elaboración de la Mezcla Madre (Master Mix)
- Para asegurar una composición homogénea, se prepara una mezcla madre